Año 3. Número 1. Volumen 5

Enero - Junio 2013

Seroprevalencia de Paratuberculosis en Bovinos de la parroquia Buría. Municipio Simón Planas estado Lara 2008.

(Paratuberculosis Seroprevalence Cattle in areas of the Municipality Buria Simon Planas city Lara state 2008).

Santeliz, Sonia¹; Giménez, José¹; Bastidas, Zoleida¹; Cova, Valsovia².

¹Universidad Centroccidental “Lisandro Alvarado” Barquisimeto Estado Lara. Venezuela. INSOPESCA². ssanteliz@ucla.edu.ve.

RESUMEN

La paratuberculosis (PTB) es una enfermedad micobacteriana, contagiosa, de evolución crónica, que afecta una amplia variedad de animales entre ellos los bovinos, caracterizada por enteropatía granulomatosa que produce caquexia y diarrea que no responde favorablemente a los tratamientos y puede conducir a la muerte del animal. El objetivo de esta investigación fue determinar la seroprevalencia de paratuberculosis en explotaciones bovinas semiextensivas en sectores de la parroquia Buría, municipio Simón Planas del estado Lara, año 2008. Se realizó una investigación descriptiva de corte transversal. El tamaño de la muestra se calculó a través de la ecuación estadística sugerida por la OPS-OMS 1973 para prevalencia desconocida, se seleccionaron por muestreo sistemático 340 bovinos mayores de 2 años, ubicados en los sectores Barro Negro, Cabimba, Cordubari y Maluenda. El análisis de las muestras de suero se realizó mediante la técnica de diagnóstico serológica inmunoensayo enzimático (ELISA). A los resultados obtenidos se les aplicó el programa estadístico Epi-Info 3.5.1 para determinar el grado de asociación entre la presencia de PTB y los factores de riesgo. Este trabajo constituye el primer reporte de paratuberculosis bovina por serología en el estado Lara, donde el sector Cabimba presentó 6,76% y Maluenda 5%, siendo los valores más altos y los valores más bajos se ubicaron en Barro Negro 3,14% y Cordubari 1,15%. El 25% de la fincas poseen animales seropositivos a paratuberculosis. La finca con mayor seroprevalencia fue la Catireña 22, 22% y Agropecuaria San Antonio 2 con 4%, siendo la menor seroprevalencia obtenida. No se observó asociación estadística significativa con la presencia de PTB y los factores de riesgo estudiados: sexo 5,6 (P>0,05), sin rotación de potrero 0,38 (P>0,05), presencia de bebederos sin lavado e higiene 0,38 (P>0,05), lactancia materna 1,63 (P>0,05), deposición y uso de excretas sin madurar 1,89 (P>0,05), sin asistencia técnica prestada en la finca 0,26 (P>0,05).

Palabras Claves: Mycobacteriumavium paratuberculosis, paratuberculosis, seroprevalencia, ELISA.

 ABSTRACT

Paratuberculosis (PTB) is a mycobacterial disease, chronic evolution contagious, affecting a wide variety of animals including cattle, enteropathy characterized by granulomatous produces cachexia and diarrhea does not respond favorably to treatment and can lead to death animal. The objective of this research was to determine the seroprevalence of paratuberculosis in cattle farms in semi-extensive sectors of the parish Buría, Simón Planas township of Lara, 2008. We conducted a cross-sectional descriptive research. The sample size was calculated through the statistical equation suggested by PAHO-WHO 1973 for unknown prevalence were selected by systematic sampling 340 cattle over two years, located in the Black Mud sectors, Cabimba, Cordubari and Maluenda. The analysis of serum samples was performed by serological diagnostic technique enzyme immunoassay (ELISA). The results obtained were applied the statistical program Epi-Info 3.5.1 to determine the degree of association between the presence of PTB and risk factors. This work constitutes the first report of bovine paratuberculosis by serology in Lara state, where the sector presented Cabimba Maluenda 6.76% and 5%, with the highest and lowest values stood at 3.14% and Black Mud Cordubari 1.15%. The 25% of the farms have paratuberculosis seropositive animals. The farm with the highest seroprevalence was 22.22% and Agricultural Catireña San Antonio 2 with 4% being the lowest seroprevalence obtained. There was no statistically significant association with the presence of PTB and studied risk factors: sex 5.6 (P> 0.05), without rotation of pasture 0.38 (P> 0.05), presence of drinking without washing and hygiene 0.38 (P> 0.05), breastfeeding 1.63 (P> 0.05), use of excreta deposition and unripe 1.89 (P> 0.05), no technical assistance in the farm 0.26 (P> 0.05).

Keywords: Mycobacteriumavium paratuberculosis, paratuberculosis seroprevalence ELISA

 INTRODUCCIÓN: La paratuberculosis (PTB), o enfermedad de Johne´s, es una enteritis crónica granulomatosa infecciosa que se caracteriza por caquexia y diarrea crónica, producto de una deficiente absorción de nutrientes esenciales y pérdidas de proteínas, que no responde favorablemente a los tratamientos, tras una prolongada fase preclínica, lo cual conduce al desmejoramiento y finalmente la muerte del animal [2; 4; 14; 25]. El agente causal de la paratuberculosis o enfermedad de Johne's es una micobacteria perteneciente al orden Actinomycetales, suborden Corynebacterinae, familia Mycobacteriaceae, género Mycobacterium, especie avium, subespecie paratuberculosis (Map) [19], cepa tipo C o tipo II [3; 28].

PTB pertenece al complejo Mycobacterium avium, de gran importancia en veterinaria y medicina por su implicación en infecciones de animales para cría y pacientes inmunodeprimidos [19]. Map afecta principalmente a rumiantes domésticos y salvajes, adquiriendo importancia económica entre las especies típicas explotadas por el hombre (bovino, ovino y caprino), también puede presentarse en ciervos, alces, llamas, bisontes, caballos, cerdos y animales de zoológico [1; 10; 16; 19; 26; 27]. La principal vía de transmisión de Map es la fecal-oral, por ingestión de alimentos contaminados con heces de animales infectados como leche o calostro [14; 21; 22]. Los bovinos infectados pueden contaminar con sus heces los pastos, la comida y el agua, lo que provoca un alto riesgo de exposición para el resto de animales susceptibles [19; 23; 25]. Los becerros son los más susceptibles, pueden estar expuestos a la ingesta de grandes cantidades de micobacterias vía calostro, leche, o al mamar las ubres sucias de las madres [5; 9; 21; 22]. La infección con Map se describe en cuatro estadios según los signos clínicos de la enfermedad: estadio silencioso, subclínico, clínico y avanzado. En los dos primeros estadios, los animales no presentan signos clínicos de la enfermedad pero son eliminadores de Map a través de sus heces en cantidades mínimas [29].Los animales progresan al estadio de PTB clínica, generalmente entre los 3 – 5 años post infección y manifiestan signos clínicos de diarrea intermitente, pérdida de peso y de producción láctea.El estadio de PTB avanzada, el animal presenta edema submandibular, diarrea persistente, observándose deshidratación y caquexia que lo conducen a la muerte [29].

En Venezuela, se conoce la existencia de PTB desde 1970, en los últimos años se han detectado varios casos clínicos en diferentes zonas del país: Lara, Trujillo, Yaracuy y zonas del Sur del Lago de Maracaibo, en fincas lecheras o doble propósito (leche-carne), en ganado mestizo Holstein y Cebú [2; 5], se encontró una seroprevalencia de 72,1% en ganadería doble propósito, en los llanos del estado Monagas y Sánchez et al. (2009), determinó la presencia de la enfermedad en la raza criollo limonero del municipio Mara, estado Zulia. Es importante señalar que vacas con paratuberculosis, en fase subclínica disminuyen la producción de leche [1; 20]. Durante la fase clínica de la infección, la liberación fecal del microorganismo es bastante alta y puede exceder 10¹⁰ CFU/g de heces [4]. En los actuales momentos la paratuberculosis ha adquirido importancia desde el punto de vista de salud pública por la vinculación de Map con la enfermedad de Crohn´s en humanos, siendo dentro de las teorías existentes, la más fuerte [19]. Map ha sido investigado principalmente en leche [11], queso [3] y agua como posibles vehículos de transmisión a la especie humana. Gracias a este tipo de estudios se ha comprobado relativamente la alta incidencia de Map en estos productos, así como la ineficacia de tratamientos como la pasteurización o la cloración a la hora de eliminar a dicho patógeno [19]. Dentro de las medidas de control de la enfermedad lo más importante es la detección temprana de animales infectados antes de que entren en la fase clínica, lo cual disminuiría el tiempo de permanencia dentro de la finca, evitando así la diseminación de Map a través de las heces. Entre las técnicas de diagnóstico en paratuberculosis, se pueden diferenciar las histopatológicas que identifican las lesiones tisulares, las etiológicas que detectan la presencia de la micobacteria como son cultivo bacteriológico y PCR IS900 [29], y las inmunológicas que tratan de detectar la respuesta inmune específica del hospedador como interferón- , Intradermorreacción y ELISA [3; 19]. El diagnóstico de la PTB es un desafío pues la efectividad de las pruebas diagnósticas depende directamente del estadio clínico del animal. Los métodos más ampliamente utilizados in vivo para el diagnóstico de Map son, el cultivo bacteriológico [29] y el ELISA [19], el cultivo tiene una sensibilidad que varía según el medio ya sea líquido o sólido de 39-82% y 80-98% respectivamente [3]. Actualmente los métodos rutinarios de diagnóstico in vivo de la paratuberculosis son el ELISA y el cultivo fecal, técnicas consideradas más específicas que sensibles, las cuales están siendo implementadas en los países que establecen programas de control de la enfermedad [19]. La detección de estos animales se logra mediante la aplicación de pruebas serológicas (ELISA), sobre todo en animales adultos, los cuales se cree que se infectan en los primeros meses de vida, desarrollando una respuesta celular al comienzo de la infección que progresa hacia una respuesta humoral cuando el animal es adulto [19]. Las medidas de prevención principalmente están encaminadas a evitar la introducción y la transmisión de la enfermedad en el rebaño, haciendo especial hincapié en la higiene durante el parto y la separación de los animales infectados, la limpieza de bebederos, conocimiento de la enfermedad y manejo de excretas. El objetivo de esta investigación fue determinar la seroprevalencia de paratuberculosis en explotaciones bovinas semiextensivas en cuatro sectores de la parroquia Buría, municipio Simón Planas del estado Lara, en el año 2008, con la finalidad de ofrecer una información real acerca de la presencia de PTB en los rebaños bovinos de los sectores estudiados.

MATERIALES Y METODOS: Es una investigación descriptiva de corte transversal [6; 8; 24]. El área de estudio se encuentra situada en los Sectores Barro Negro, Cabimba, Cordubari y Maluenda de la parroquia Buría, municipio Simón Planas, estado Lara, con una explotación de ganado bovino especializado en la producción de carne y leche [7]. El procedimiento estadístico de muestreo sistemático al azar, garantizando la inclusión de cada bovino mayor de 2 años, de acuerdo con la probabilidad proporcional del tamaño del rebaño. Para calcular el tamaño de muestra, se empleó la ecuación estadística sugerida por la (OPS, 1973), para prevalencia desconocida, siendo la muestra de 340 bovinos. A través de la técnica de ELISA se detecta animales con infección clínica y subclínica [2]. Se recolectaron 5 cc de sangre de la vena coccígea media, utilizando el sistema venoyet-Vacutainer®, sin anticoagulante, se sometieron a un proceso de centrifugación a 2.500 rpm por 2 minutos. Luego el suero fue trasvasado a tubos de Eppendorf® de 1,5 ml, siendo sometidos a un proceso de congelación de -30°C hasta su procesamiento, utilizando el kit comercial de ELISA para suero, plasma y leche (Institut Pourquier, POURQUIER® ELISA Paratuberculosis Antibody Screening, Francia), y se siguieron las instrucciones recomendadas por el fabricante.

Análisis descriptivo: Una vez obtenidos los resultados se procedió a determinar la seroprevalencia definida como la proporción que representa la probabilidad de que un animal tenga una enfermedad específica en un momento dado a través de la siguiente formula, expresada en porcentaje (%):

Análisis estadístico: A los resultados obtenidos se les aplicó el programa estadístico Epi-Info 3.5.1 para determinar el grado de asociación entre la presencia de PTB, representado por los resultados de la prueba de ELISA, con los siguientes factores de riesgo: sexo, lactancia materna, sin rotación de potrero, presencia de bebederos sin lavado e higiene, deposición y uso de excretas sin madurar y fincas sin asistencia técnica.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN: Del total de animales muestreados (340), 12 bovinos dieron seropositivos a ELISA para el diagnóstico de paratuberculosis, arrojando una seroprevalencia total de 3,53% (cuadro N° 1). Los resultados obtenidos en este estudio son similares con los de Scott et al. 2009, con 3,4% de seroprevalecia en vacas lecheras de EUA y están dentro del rango de los análisis presentados por Sánchez et al. (2009), quienes al realizar el estudio serológico contra paratuberculosis en la raza criollo limonero del municipio Mara, estado Zulia, obtuvieron 1,45% de seropositividad en muestras de suero sanguíneo y 5,19% en leche. Sin embargo estos resultados difieren de los obtenidos por Alfaro et al. (2006), quien reporta niveles más altos de seroprevalencia (72,1%), por los llanos del estado Monagas, en ganadería doble propósito.

 CUADRO N° 1 SEROPREVALENCIA DE PARATUBERCULOSIS BOVINA EN SECTORES DE LA PARROQUIA BURÍA, MUNICIPIO SIMÓN PLANAS, ESTADO LARA, PERIODO JULIO – AGOSTO DE 2008.

Al evaluar la seroprevalencia por sectores se puede observar (Cuadro 1) que los sectores Cabimba y Maluenda presentaron la mayor seroprevalencia encontrada en el estudio, siendo de 6,76% y (5%) respectivamente; mientras que en los sectores Barro Negro (3,14%) y Cordubari (1,15%) la seroprevalencia fue significativamente menor. Estos resultados expresados según el sector son similares a los obtenidos por Radostits et al. (2002), Holzmann (2004), y Alfaro et al. (2006). La seroprevalencia en los sectores estudiados se presentó entre 1,15% y 6,76%, equivalentes a los obtenidos por Prieto et al. 2004, el cual obtuvo resultados que oscilaban entre 0-22%. Por otro lado los resultados de la investigación son diferentes a los de Santillán et al. 2003, quien obtuvo una seroprevalencia de paratuberculosis en Guanajuato-México 10,7% y a su vez difirieren con los estudios en Venezuela realizados por Alfaro et al. 2006, en los llanos de Monagas reporta una tasa de reactores para la zona oeste, municipio Ezequiel Zamora 61,6% y para la zona noreste, municipio Maturín 82,5%, con diferencias altamente significativas (P<0,001). Ferré (2005) y Shawn et al. (2006), consideran que las causas por las cuales pueden encontrarse seroprevalencias en rangos tan variados obedecen a factores tales como la diversidad en las prácticas de manejo, la raza, condiciones agroecológicas y tipo de explotación; en la presente investigación la ganadería bajo estudio se manejaba en forma semi-extensiva, sometida a un solo ordeño y con un número pequeño de animales por predio. Se investigó sobre la posible asociación con estos factores, pero no se encontraron diferencias estadísticamente significativas que validaran asociación entre los factores de riesgo estudiados.

CONCLUSIONES: Se evidenció por serología la presencia de paratuberculosis en explotaciones bovinas semi-extensivas de la parroquia Buría, municipio Simón Planas del estado Lara, resultando 12 animales seropositivos lo cual representa una seroprevalencia de 3,53%. La seroprevalencia osciló entre 1,15% y 6,76%. El sector con mayor seroprevalencia fue Cabimba con 6,76%. No se encontró asociación estadística significativa entre los factores de riesgo considerados en esta investigación y la presencia de paratuberculosis bovina. No se encontraron antecedentes de paratuberculosis en los sectores estudiados, no obstante se infiere que la entrada de animales de reposición, sin control sanitario, favorece la presencia de la enfermedad considerando que la mayoría de las fincas se infectan con la compra de bovinos enfermos aparentemente sanos.

AGRADECIMIENTO: CDCHT por los aporte al proyecto.

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